氧化应激是指肌内氧化失衡的状态，也是肝损伤的主要原因。 一旦出现氧化应激症状，培养适量的氧自由基会损伤细胞，导致氧化应激障碍。 争议认为，活性氧(ROS )是氧一般代谢过程中的产品，也是诱发氧化应激的主要物质，过多的ROS作用于基因组稳健性，可能导致多种耐药疾病的发生。
紫萼玉簪又名紫花玉簪，百合科(Liliacea )玉簪属) Hosta )多年生宿根木本植物，全草或根入药，可食用。 目前，玉簪中黄酮、皂苷及多糖等身份已被揭示具有特定的抗炎抗菌活性，但关于紫萼玉簪根系多糖(HVRP )抗氧化机制的争议不大。 吉林农业大学食品迷信与工程学院的吴金姗、刘回平易近*和吉林农业大学生命迷信学院的刘洪章*等探讨了HVRP对叔丁基过氧化氢(叔BHP )导向的HepG2细胞氧化应激障碍的作用，探讨了HVRP抗氧化影响机制
1、单因素考察了局
料液比、提取温度及提取时对多糖提取率的作用如图1所示，当料液比为130时，提取率达到最大； 随着提取温度的升高，提取先进行后降低，80 时提取率达到最大； 随着提取时间的缩短，提取先推广后降低，2h提取率最大。 当提取温度超过80 、时间超过2h时，多糖受到持续低温的作用而分化，提取率上升。
2、对站进行了分解，以反映面优化考察
反映了人口实验试图与局部分解
根据表3局，利用Design-Expert软件对考察数据进行多元回归拟合，得到二次多元回归铸型方程，y=24.44 (1.21 a 0.46 b 0.55 c 1.35 ab-2.77 AC 0.78 BC-3.18 BC )
二次结晶器返回统计分解局如表4所示，返回结晶器高度高(p<0.0001 )，失实项P=0.879 6，确定系数R 2=0.993 4)，检定后R 2Adj表示返回方程拟合优度较好，考察方式有较高的可信度f值表明，各因子对HVRP提取率的作用水平为提取温度>； 原料液比>； 是提取时间。
提取过程优选可靠确定和验证
结晶器降解HVRP的最佳提取工艺条件为提取温度83.63 、提取时光2.92小时、料液比130.60、预计提取率24.9%。 根据理论，根据后天3夜的情况，维护工艺为萃取温度84 ，萃取时间3h，料液比131，HVRP萃取率23.9%，缺点1%，说明该模具可行性较高。
3、HVRP理化性质
脱脂、脱蛋白处理后HVRP提取率为9.29%。 测定HVRP中恢复性糖的质量分数为11.17%(111.66mg/g )，蛋白质量分数为0.6% )今天1早上5.96 mg/g )，糖醛酸含量高，质量分数为12.31% ) 123.12mg/g ) )。 讨论表明，采用咔唑法测定东北玉簪多糖中糖醛酸质量分数为20.36%~52.76%； 百合多糖中糖醛酸的质量分数达12.89%。
4、HVRP组织性格分解了局
由图2A可知，HVRP红外光谱在3 422 cm -1处有较强的接收峰，是由o-h伸缩振动引起的； 2 916 cm -1接收峰值为c-h伸缩振动； 1 745、1 634、1 446 cm -1的接收峰为C=O，表明HVRP中存活的糖醛酸与理化分解，局部统一，这是由于称呼和错误标记引起的拉伸振动； 1(088cm-1 )的接收峰来自吡喃糖环的醚键，表明HVRP可能是吡喃糖； 813、614 cm -1的接收峰表明可能含有型糖。
如图2B所示，随着NaOH浓度的增加，HVRP和刚果红试剂影响后的最大接收波长不断减小，与刚果红相比没有发生红移。 最大接收波长逐渐减少，可能是由于HVRP在水溶液中随机卷曲构象，且氢键不断被碱性溶液损伤。 由此判断，HVRP没有存活三螺旋构象。
5、HVRP的体外抗氧化活性
如图3所示，随着HVRP质量浓度的增大，抗氧化活性先升高后加强，与特定剂量效应相关，当HVRP质量浓度为100 g/mL时，DPPH自由基清除率为63.93%，羟自由基清除率为70 HVRP表现出较强的体外抗氧化能力，其抗氧化活性可能与HVRP中特定的糖醛酸有关。
6、HepG2细胞存活率
选择MTT法检测HVRP的细胞内毒性，如图4A所示，0~100g/mL的HVRP对HepG2细胞繁殖无毒性，质量浓度为200 g/mL时，HepG2细胞活性气体被抑制。 因此，抽取5、25、100 g/mL进行细胞试验。
为了探讨HVRP对肝细胞氧化损伤的影响机制，选择t-BHP制备氧化损伤模板。 如图4B所示，HepG2细胞的活性气体随t-BHP浓度的推进而明显降低。 用GraphPad Prism 7.0软件进行拟合，结果表明失去t-BHP影响的半抑制浓度(IC 50 )为(217.5220.94 ) mol/L。 因此，抽取浓度220 mol/L的t-BHP制作细胞氧化损伤模板。
7、HVRP对氧化损伤细胞抗氧化能力稍有作用
从图5A可以看出，t-BHP影响HepG2细胞时，ROS的天生量是一般组的4.65倍。 HVRP处置的恐惧
怕极昭著升高ROS水平，HV100组ROS水平升高至一般组的1.27 倍。如图5B～F所示，与模子组比拟，HVRP能昭著或极昭著升高MDA含量，昭著或极昭著进步SOD、CAT以及GPx活气并推广GSH含量。以上了局阐明HVRP恐怕经过进步氧化损害细胞的抗氧化酶活气、升高ROS水平来帮忙细胞抵挡氧化损害。8、HVRP对于氧化损害细胞中Keap1/Nrf2/ARE记号通路基因表达量的作用
由图6可知，与模子组比拟，HVRP处置总体上可分明上调氧化应激通路中GST、HO-1、NQO1、JNK、Keap1、Nrf2基因的表达，当HVRP处置质量浓度为25 μg/mL时，以上基因的表达量极昭著上调，个中抗氧化记号通路卑劣基因GST、HO-1、NQO1表达量不同为模子组的4.36、4.67、5.28 倍。
9、HVRP对于氧化损害细胞中Keap1/Nrf2/ARE记号通路蛋白表达量的作用
为进一步验证HVRP的抗氧化影响体制，选择Western Blot检测相干蛋白表达状况，与基因表达了局如同，HVRP组较模子组分明进步了Nrf2/ARE通路卑劣NQO1、HO-1蛋白表达水平（图7A）。
Nrf2的核转化是向导NQO1以及HO-1表达的枢纽方法，HVRP处置使细胞质内Nrf2水平呈剂量依附型升高趋势，而细胞核内Nrf2水平呈剂量依附型上升，说明HVRP能匆匆进Nrf2的核转化（图7B）；与模子组比拟，HVRP处置进步了Nrf2/ARE通路上游激酶p-JNK/JNK水平（图7C）。上述了局与文献[32]了局如同，提醒JNK磷酸化大概会匆匆进Nrf2核转化，进而调控Nrf2/ARE通路卑劣II期解毒酶NQO1以及HO-1的表达。
结 论
本测验优化了HVRP提取工艺，失去最优提取条件为：提取温度84 ℃、提取时光3 h、料液比1∶31，该条件下HVRP提取率为23.9%。体外抗氧化测验说明HVRP拥有较强的自在基消除活性。抗氧化体制争论证实了HVRP经过激活氧化应激Keap1/Nrf2/ARE记号通路起到损坏HepG2细胞免受t-BHP向导的氧化损害影响。综上，本争论可为HVRP算作自然抗氧化剂正在功能性食品中的开垦利用供给迷信按照。
01
通信作家
刘洪章教授，中共党员，博士，吉林农业大学生命迷信学院博士生导师，曾经任园艺系主任、中药材学院院长、生物本领学院党总支书记、生命迷信学院院长。吉林省中心学院以及吉林省劣势特点中心学科发动人、吉林省优厚熏陶团队发动人、吉林省特点专科发动人、国家精品视频秘密课《长白山特点植物资源》主讲人以及吉林省精品课程《生物资源学》主持人、吉林省果树品种鉴定委员会主任以及长春市园艺学会理事长等职。制造了“作物资源学”博士授权学科，主建了吉林农业大学第一个理学一级学科“生物学”硕士授权学科并将其修建成为了吉林省中心学科；主讲本科生课程《生物资源学》以及《今生农业与本领概论》以及争论生的《生物考察明天2下午妄图与统计分解》及博士生的《作物资源学》以及《生物资源各类性及其损坏》等课程，主要进行长白山特点园艺植物资源及生物本领争论，主持国家科技部、农业部以及吉林省科技厅问题十余项，宣布学术论文150余篇，主持选育新品种8个，教育硕士以及博士争论生八十余人，主编课本以及著作12部；取得吉林省科技前进1、二、三等奖7项以及吉林省熏陶结果二、三等奖5项，被评为吉林省师德先辈集体、长春市师德标兵以及第七届吉林省低等学塾熏陶名师。
刘回平易近副教授，中共党员，博士，吉林农业大学食品迷信与工程学院硕士生导师。主要进行分子营养以及食品化学范畴的争论处事，正在自然植物活性身分的结合提取、功能争论以及寄递方面博得了系列改革性结果。主持负担国家十三五中心研发讨论子问题、吉林省当然基金项目等国家、省部级项目6项，正在 Journal of Agriculture and Food Chemistry, Food Chemistry, Food Function, Nutrients, Food Control, 食品迷信等海内外学术期刊宣布论文40余篇，取得省部级科研惩罚8项，副主编课本1部。担负 Journal of Agricultural and Food Chemistry, Food Research International, Phytomedicine, Food Function, Journal of Functional Foods等国际期刊审稿人。
02
第一作家
吴金姗，中共党员，吉林农业大学食品迷信与工程学院2020级硕士争论生，争论方向为食品迷信与功能性食品。以第一作家身份正在 International Journal of Biological Macromolecules（JCR2区）宣布SCI论文一篇，屡次取得争论生学业奖学金及优厚争论生干部等信誉称号。
本文《玉簪多糖对于细胞氧化应激损害的损坏影响体制》起因于《食品迷信》2022年43卷17期138-146页，作家：吴金姗，黄榕，刘树英，刘回平易近，刘洪章，刘景圣。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20210602-026。点击下方赏玩原文便可检察文章相干信息。
改动/编写：袁艺；负担编写：张睿梅
图片起因于文章原文及摄图网。
为进一步匆匆进动物源食品迷信的繁华，动员家产的本领改革，更好的保险人类体魄强健以及进步糊口品格，北京食品迷信争论院以及中国食品杂志社正在宁波以及西宁乐成召集前两届“动物源食品迷信与人类强健国际钻研会”的根底上，将与郑州轻工业大学、河南农业大学、河南工业大学、河南科技学院、许昌学院于 2022年12月3-4日 正在河南郑州独特举办“2022年动物源食品迷信与人类强健国际钻研会”。接待相干各人、学者、企业家投身此次国际钻研会。